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[color=Black][size=4][font=楷体_GB2312]甲基化检测方法(亚硫酸氢盐修饰后测序法) [转自 丁香园论坛]
甲基化是目前的研究热点,就我所做的一点工作并其中一点心得,与大家分享。希望能够对大家
2011年09月02日发布人:finger
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本人最近在做三溴化硼脱甲基的实验,因为是第一次做,所以遇到的问题很多,望广大虫子们能给予帮助啊!
我反应的底物是个酯,大致的结构就是两个取代的苯环连在一起,其中的一个苯环上连有一个NO2,一个OH,一个OCH3,我要脱的就是这个甲氧基
2014年06月11日发布人:vbnm
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本人用硫酸二甲酯甲基化 ,类似文献报道说用溶剂DMF,碱性 用碳酸钾,请问硫酸二甲酯和底物及碱 三者的比例大概多少?温度设多少?各位高手,还有关于该反应要注意哪些问题?多谢了。。。,什么都不加。就加硫酸二甲酯就好了
个人观点 仅供参考
2013年06月21日发布人:hero_b
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[size=2][color=Black][font=黑体]
我做了三周的甲基化特异性PCR了,可用修饰完的DNA做模板,甲基化、非甲基化引物都扩不出来,而野生型引物确能扩出来,引物设计应该没问题,我现在高度怀疑是亚硫酸盐修饰有问题
2016年04月07日发布人:小荷尖尖
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[size=2][font=Impact][color=Black]目的:1.DNA甲基化处理,2.甲基化特异PCR
已试方法:
利用chemicon 公司的CpGenome™ DNA Modification Kit 进行甲基
2016年04月08日发布人:阿福
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[size=2]
我做了三周的甲基化特异性PCR了,可用修饰完的DNA做模板,甲基化、非甲基化引物都扩不出来,而野生型引物确能扩出来,引物设计应该没问题,我现在高度怀疑是亚硫酸盐修饰有问题,不知用国产的亚硫酸氢钠和对苯二酚(北京化学试剂
2016年03月03日发布人:newway
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[size=4][color=Navy][font=楷体_GB2312][求助]DNA Bisulfite处理以及甲基化特异PCR
求助群内有经验者:
在DNA Bisulfite 处理以及甲基化特异PCR的准备工作时候,遇到
2013年03月27日发布人:星星点灯
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助溶剂,或者表面活性剂。如聚乙二醇。
你这个应该是表面活性剂类的配方。,是不是出现沉淀了?
有可能是氯化钡缓慢水解,生成氢氧化钡了
补充一下
单独的 十六烷基三甲基溴化铵 溶液应该是很稳定的,这个溶液是做什么用的呀?
是否要现用现配呀?,低温保存一下会有所帮助的。
2011年10月01日发布人:mn8669854
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[size=4][color=Black][font=黑体][求助]甲基化PCR
我用亚硫酸氢盐修饰后PCR扩增的方法做甲基化。PCR有大小合适的带但还有一些杂带,测序结果也是很多杂峰,不知道如何提高特异性。是酶的原因吗?大侠
2013年03月27日发布人:我是一片云
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链大沟中呈特定三维结构。基因组中60%~ 90% 的CpG 都被甲基化, 未甲基化的CpG 成簇地组成CpG 岛, 位于结构基因启动子的核心序列和转录起始点。有实验证明超甲基化阻遏转录的进行。DNA 甲基化可引起基因组中相应区域染色质结构变化, 使DNA 失去核酶ö限制性内切酶的切割位点, 以及DNA 酶的敏感位点, 使染色质高度螺旋化,
2013年12月20日发布人:ssonglikihi